검사의뢰
검체채취방법
검체채취 및 취급요령
- 검사결과의 품질은 적절한 검체 채취와 취급방법에 따라 영향을 받습니다.
- 위생 및 안전상 주의가 반드시 필요하므로, 모든 검체는 감염성 물질로 간주하여 주시기 바랍니다.
- 모든 검체는 의뢰하시기 전 새지 않도록 잘 밀봉하시고 지정 용기를 이용하여 주시기 바랍니다.
1. 혈액(Blood) – 혈청(Serum)을 이용하는 검사
혈청을 이용하는 검사
1) 진공혈청관 분리(SST)을 사용하는 경우
- NTL이 제공하는 진공혈청분리과(SST)을 사용하여 주십시오.
- 진공채혈기로 채혈하는 경우 tube의 뚜껑을 열 필요 없이 주사침을 꽂으시면 필요한 양만큼 혈액이 흡입됩니다.
[일반주사기로 채혈시 주의 사항]
※ 주사기로 채혈하여 SST에 넣을 때는 진공채혈 뚜껑을 손으로 연 다음, 주사바늘을 빼고 주사기 입구를 tube의 기벽에 대고 살며시 넣어 주십시오. [빠른 속도로 주입하는 경우 용혈(Hemolysis)이 발생합니다.]
- 혈액 채취량은 각 검사 항목에 필요한 혈청량의 2.5배 이상 취하십시오.
- 혈액을 채혈한 후 적어도 30분이 경과한 후에 원심분리 하십시오.
- 분리된 혈청은 다른 용기에 옮길 필요 없이 그대로 보관하십시오.
[주의]
※ 치료 약물 모니터링 혹은 독성학적 분석을 위한 검체는 결과가 낮게 측정될 가능성이 있으므로 Plain tube를 사용하시고 혈당 단독검사일 경우 NaF tube를 사용하시기 바랍니다.
2) 혈청분리과(Separator)을 사용하는 경우
- 혈청분리관(Seperator)에 혈청을 분리하여 보낼 때에는 혈청분리관 입구를 새지 않도록 완전히 밀봉한 후 보내 주십시오.
2. 전혈(Whole Blood) – 항응고제를 넣은 혈액을 이용하는 검사
일반혈액(CBC)검사
- Potassium EDTA vaccutainer tube에 정확히 혈액 3mL를 넣어주십시오
- 검사는 2시간 이내에 이루어져야 하며 실온에서 6시간 이상 방치시 MCV, ESR, PLT, WBC count, Reticulocyte (2일내 소실) 등의 영향을 받습니다.
- 즉시 검사가 어려울 경우에는 4℃에서 보관하며 24시간까지는 CBC 결과가 안정합니다. 절대 얼려서는 안됩니다.
[주의]
※ 세포면역 검사인 경우에는 실온 보관을 하십시오.
혈액도말, 혈액관찰을 목적으로 하는 검사
- 신선한 검체를 사용하여 얇고 고르게 도말해야 정확한 감별이 가능합니다.
- 채혈후 천천히 혼합후 반드시 냉장보관하여 주십시오.
- 수거 전 이미 24시간 경과한 검체는 검사결과가 부정확 할 수 있습니다.
※ 정확한 임상 진단을 위해서는 일반 혈액 검사 결과가 필요하므로, 반드시 소견을 제공하여 주십시오.
※ 말초혈액 (Peripheral Blood Smear, PBS) 의뢰시 Lancet 천자가 유용합니다.
※ 골수 (Bone Marrow)는 formalin 등에 오염되거나 희석이 심할 경우에는 검사가 불가능하며,
고정이 완전치 않거나 고정액이 제거되지 않은 검체는 검사에 영향을 미칩니다.
※ 특수염색이 필요한 경우에는 사전에 연락을 드리겠습니다.
혈액응고검사 (Sodium citrate)
- 일반적인 항응고제는 3.2% Sodium Citrate입니다.
※ 혈액과 항응고제의 비율은 9:1이며 채혈량을 3.2% Sodium citrate Tube 용기에 표시합니다.
※ 비율을 정확히 지켜 주십시오. 비율이 정확하지 않을 경우 검사결과에 영향을 끼칠 수 있습니다.
※ 검체는 원심분리하여 Platelet poor plasma 상태로 검사 전까지 냉동 보관합니다.
※ 육안적으로 용혈된 검체나 지방성분이 많은 혈액 또는 응고된 검체 등은 혈액응고 검사 결과에 영향을 초래하므로 혈액을 재 채취하여 재검사를 하는 것이 좋습니다.
세포면역검사(Lymphocyte subset)
- Potassium EDTA vaccutainer tube에 혈액 3mL를 지켜 주십시오.
※ 검체는 반드시 실온상태로 보내십시오.
※검체의 안정성을 위하여 주말 및 휴일전일 의뢰는 삼가하여 주십시오.
※ 다음은 검체 거절기준이므로, 참고하여 주십시오.
- 검체량이 부족하거나 심하게 용혈된 검체
- 응고된 검체
- EDTA 또는 heparinized whole blood 이외의 항응고제를 사용한 검체
- 냉장 보관하였거나 실온에서 24시간 이상 경과된 검체
※ 다음은 검사결과에 영향을 미치는 사항입니다. 참고하여 주십시오.
- 채혈한 혈액을 냉장 보관하는 경우 CD4+ 세포 수가 감소할 수 있습니다.
- 백혈구 수가 3.5×103 미만인 경우 또는 9.4×103 /㎕ 이상인 경우
- EBlast 등 미성숙 유핵 백혈구가 많은 경우 또는 유핵 적혈구가 많이 포함된 검체
3. 소변(Urine) – 24시간 뇨나 단회뇨를 이용하는 검사
일상적인 검사를 위한 단회뇨(정성검사/Random Urine)
채취시간
- 아침 첫 소변(특히 임신반응검사)이 농축되어 있으므로 일반적인 검사에 가장 적합합니다.
- 반드시 식후 2시간 이상 경과하고 심한 운동을 하지 않은 때에 채취하십시오.
보관
- 의뢰하기 전까지 반드시 냉장고에 보관하십시오.
체취방법
- 뇨 검사를 위한 채뇨법으로는 중간뇨(midstream voided urine)가 가장 적합합니다.
[주의]
※ 세포면역 검사인 경우에는 실온 보관을 하십시오.
24시간뇨(정량검사/Day Urine)
체취방법
- 채뇨를 시작할 때는 일단 방광을 완전히 비우도록 배뇨시키고, 이때 소변은 버리십시오.
- 이후부터 24시간 내의 모든 요는 전부 받으십시오.
(예: 오전 6시부터 그 다음날 오전 6시까지의 소변을 모으고자 할 경우는, 첫날의 6시 소변은 버리고 다음 소변부터 다음날 6시까지 전부 모읍니다.)
[주의]
※ 24시간뇨를 받을 때는 알코올이나 기타 영양을 미칠 수 있는 음식 또는 약물 복용을 금합니다.
※ 모든 정량적인 검사는 24시간 뇨를 채취하여 그 양을 정확히 측정하고, 잘 혼합한 후 적당량을 취하여 보냅니다. (총뇨량 기록)
※ 검사 종목에 따라 보관방법, 보존제 첨가 등을 결정하십시오.
주간뇨와 야간뇨를 구별할 필요가 있을 경우(12시간 뇨)
- 주간뇨: 오전 8시부터 오후 8시까지 채뇨하되 아침 식사는 채뇨 시작 후에 하십시오.
- 야간뇨: 오후 8시부터 다음날 오전 8시까지 채뇨하되 저녁식사는 5시에 하십시오.
4. 세균배양을 위한 검체 채취
미생물 검사는 다양한 종류의 정상 상재균과 오염균으로부터 질병의 원인이 되는 병원균을 분리, 배양하여 동정 및 감수성 검사를 실시합니다. 미생물 검사의 정확도 및 신뢰도에 크게 영향을 줄 수 있는 것은 검체 채취 방법 및 검체의 보관과 임상정보 등 입니다.
| Culture | 용기 | 필요량 | 보관법 | 참고 |
|---|---|---|---|---|
| Blood Culture | 전용용기 | 각 Bottle마다5mL | 37°C | 냉장 불가 |
| Urine Culture | 멸균시험관 | 10mL | 냉장 | 임균 의심시 실온, 추가오더 필수 |
| Sputum Culture | 객담 용기 | 1~5mL | 냉장 | |
| Throat Culture | 수송배지 | 소량(면봉) | 냉장 | 임균 의심시 실온 |
| Pus Culture | 멸균/수송 | 1~10mL | 냉장/실온 | 임균 의심시 실온 |
| Body Fluid Culture | 멸균시험관 | 1~10mL | 냉장 | |
| CSF Culture | 멸균시험관 | 1~10mL | 실온 | |
| Catheter Tip | 수송배지 | 냉장 | ||
| Genital Tract Culture | 수송배지 | 소량(면봉) | 냉장/실온 | 임균 의심시 실온 |
| Stool Culture | 채변용기 | 1~2g | 냉장 | |
| Anaerobic Culture | 주사기/밀봉 또는 혐기성 혈액배지 | 적당량 | 냉장 | 혐기성 상태 유지 |
검체 정보 기재 사항
- 환자명
- 연령
- 성별
- 주민등록번호
- 임상증상 (원인균의 보고 및 검사방법 등에 참고로 이용됩니다)
- 외래, 입원 여부
- 진료과명
- 검체 채취일자 및 시간
- 항균제 투여여부
[향균제 투여여부 참고사항]
※ 항균제 투여 전에 검체를 채취하는 것이 원칙이지만, 이미 투여되고 있을 때는 그 종류와 최종 투여로부터 검체 채취까지의 시간을 기록합니다.
면봉 검체는 미생물 수송배지에 채취합니다.
※ 일반적으로 탈지면 면봉에는 살균성이 있어, 균이 사멸하기 쉬우므로, 검체를 채취한 면봉은 즉시 수송배지에 넣어야 합니다.
검체를 채취한 면봉을 그대로 방치하면, 대부분의 균은 급속히 사멸합니다.
검체 채취와 일반적인 검사법에 대한 주의
- 검체는 채취 후 즉시 냉장고에 넣어 보관하며 가능한 신속히 진단검사의학과로 옮깁니다. 실온에 방치된 검체에서는 원인균뿐만 아니라, 오염균도 증식하여 원인균의 판정을 곤란하게 합니다. 그러나, 임균 및 수막염균을 의심하는 경우는 반드시 실온에 두어야 하며, 신속하게 검사실로 운송해야 합니다. 특히 수막염균, 임균, 창상 배양은 신속히 배양하지 않을 경우, 균 사멸, 균의 과도한 증식으로 인해 결과의 해석에 오류를 범할 수 있으므로 신속히 검체 운반 및 배양을 실시해야 합니다.
- 농 (고름), 천자액 등 혐기성 균 배양을 필요로 하는 검체는, 주사기로 흡인 채취한 후 주사기 내의 공기를 제거하고, 고무마개에 찔러 공기와의 접촉을 차단합니다. 면봉으로 채취한 검체는 비록 수송배지에 넣는다 하여도 혐기성균의 검출율이 현저하게 저하합니다.
- 검체 용기는 검체가 외부에 노출되지 않도록 꼭 맞는 뚜껑이 있는 용기(Screw capped tube)를 사용합니다.
(앞의 표 참조)
검체 채취법
1) 혈액
주의사항
- 혈액으로부터 분리된 균은 감염의 원인균으로 판단됩니다.
- 채취시 오염을 방지하기 위해서는 피부 및 용기의 소독을 충분히 실시하여야 합니다.
- 소독용 알코올로만 닦아서 깨끗이 하는 것은 오염을 막을 수 없습니다.
소독
- 채혈부 피부의 소독 소독용 알코올로 잘 닦아 건조시킨 후 요오드를 충분히 도포해 건조시킵니다.
- 채혈 용기의 소독 바늘을 찌를 혈액 채혈 용기의 고무 마개를 소독용 알코올로 소독합니다.
채혈량
- 호. 혐기성 세균 배양용기에 약 5㎖씩 (성인 기준)의 혈액을 주입 후 가볍게 흔들어 혼합니다.
보관 및 운반
- 채혈한 용기는 35℃에 보관하는 것이 바람직하지만 어쩔 수 없을 때는 실온에 두며, 최대한 신속하게 검사실에 반입합니다.
기타
- 다른 용기에 채취하여 응고된 혈액이나 일반 혈액검사용 채혈 용기에 채취한 혈액은 적합하지 않습니다.
- 채혈 시 사람의 이동 등에 의해 공기가 유입되지 않도록 합니다.
[참고사항]
※ 심내막염, 동맥 내막염, 장티푸스 초기에는 균혈증이 지속적이지만 그 외의 질환에서는 혈액 중 균의 출현이 간헐적이기 때문에, 발열 초기에 채혈한 것이 가장 양성율이 높다고 여겨집니다.
※ 혈액 배양에서 가장 높은 양성율을 얻으려면, 발열 초기에 1일 1시간 이상의 간격으로 3회의 채혈이 권장됩니다.
※ 폐렴 수막염 등에서는 균혈증을 유발하는 것이 많아 혈액배양으로 원인균을 동정할 수 있는 경우가 많습니다.
2) 골수액 및 천자액
주의사항
- 채취 시 해당하는 피부의 소독은 혈액 배양의 채혈 방법에 준해 엄중하게 실시해야 합니다.
- 혈액배양과 같게 혈액 배양 용기에 담아 운송하십시오.
- 슬라이드 도말용 검체는 가능한 신속하게 검사실에 운송합니다.
[참고사항]
※ 수막염의 주된 원인균은 신생아에서는 대장균. B군 연쇄구균, 리스테리아, 2개월~5세의 소아에서는 인플루엔자균, 수막염균, 그리고 연령층에 무관한 것은 폐렴 구군, A군 연쇄구균, 황색 포도상구균, 스트램토코코스 등입니다.
3) 상기도 검사대상 물체
주의사항
- 검체 채취는 환자의 입을 크게 열게 한 상태에서 설압자로 가볍게 혀를 누르고,「아―」라고 발성시키면서 면봉으로 구개부의 후방 및 편도간의 구개활 점막을 닦아 채취합니다.
- 비인강 검체의 채취는 목과 같이 면봉을 이용하든지 분비물이 많은 경우에는 멸균한 부드러운 고무관 또는 비닐관으로 흡인합니다.
- 검체는 즉시 수송배지에 넣어 냉장고에 보관하고 최대한 신속하게 검사실에 운송합니다.
- 백일해 균의 검사는 특별한 요구가 있는 경우에 실시합니다. 그 검체는 비인강 검체가 적합합니다.
[참고사항]
※ 목구멍을 닦은 면봉이 상기도 감염 검사의 검체로써 가치가 있는 것은 소아만으로, 성인에서는 통상 가치가 없다고 판단합니다.
※ 목구멍을 닦은 검체를 배양하여 원인균으로 정의되는 분리균은 A군 연쇄구균, 디프테리아균 및 마이코플라즈마와 클라미디아입니다.
※ 상기도에는 a 연쇄구균, 포도상구균, 나이세리아, 헤모필루스, 페렴구균, 모락셀라, 코리네박테리움 등이 상재하고 입원환자에서는 그 외에 각종의 그람 음성균이 정착하고 있으므로, 비록 그 중의 어떤 균이라도 그것을 정상 상재균과 구별하는 것은 곤란합니다.
※ 상기도 감염을 의심하는 검체로 목보다 비인강을 닦은 검체가 가치가 있으므로, 원인균은 자주 비인강의 검체의 균을 우위로 둡니다.
※ 소아의 급성 인두개염의 원인균은 대부분 혈액으로부터 검출되므로, 목을 닦은 검체로는 검출한다 하여도 진단할 수 없습니다.
※ 급성 중이염의 검사로 귀고름이나 와이도로부터 채취한 검체는 고막 파열이 없는한 가치가 낮고 오히여 비인강검체가 적합합니다.
※ 와이도를 거쳐 채취한 검체에서는 역시 상재균과 원인균의 구별이 곤란합니다.
※ 급성 중이염의 주된 원인균은 페렴구균, A군 연쇄구균, 인플루엔자균, 혈장응고 효소 양성 및 음성 포도상구균, 대장균, 클렙시엘라, 모락셀라, 녹농균 등이 있습니다.
4) 하기도 검사대상 물체
객담(Sputum)
- 객담은 항상 구강 및 상기도 상재균에 의해 오염되므로 채취 전에 멸균 생리 식염수로 입안을 잘 헹군 후, 객담 용기에 뱉어 운송합니다. 객담이 많이 나오지 않는 환자는 식염수를 분무한 후 채취합니다.
- 기관 흡인액 및 기관지 세정액은 객담이 나오지 않는 환자에게 적용됩니다.
- 객담의 품질 등급에 의해 4, 5 등급은 수용되며, 1~3등급은 부적합 검체로 처리됩니다.
- 1~3 등급의 경우에도 주치의의 의뢰가 있을 경우에는 검사가 가능하며, 결과지에 등급이 표시됩니다.
| Grade | Number of Cell / Pover Field | |
|---|---|---|
| Epithelial Cell | WBC | |
| 1 | > 25 | < 10 |
| 2 | > 25 | 10~25 |
| 3 | > 25 | > 25 |
| 4 | 10~20 | > 25 |
| 5 | < 10 | > 25 |
- 항산균을 위한 검체의 경우 아침에 양치 후 첫 객담을 하루 한번씩 3회 반복 채취하는 것이 양성율을 증가시킵니다.
- 항산균을 위한 검체의 경우 검체 채취 후 30분이내에 검사실로 운반하는 것이 이상적이며, 적어도 1일을 초과해서는 안됩니다.
- 항산균을 위한 검체의 경우 채취 후 1시간이내는 냉장 보관해야 합니다.
5) 뇨
자연 배출뇨 주의사항
- 이른 아침 첫 회의 뇨를 채취하는 것이 바람직합니다.불가능할 때는 가능한 한 배뇨에 간격을 두고 뇨를 채취합니다. 균뇨의 판정 기준으로 되어 있는 105 CFU/ml은 아침 기상 후의 첫 회 뇨의 연구 결과에 의한 것으로, 첫회뇨 배출 후는 뇨중균수는 1/10 이하로 감소하는 것이 많습니다.
- 배뇨전, 특히 여성에서는 외음부를 미리 10% 알칼리 비누액으로 세정하고, 그 다음에 멸균 생리 식염액으로 충분히 세정하여 최대한 외음부 상재균에 의한 오염을 제외합니다.
- 여성에서는 한 손으로 음순을 열면서 배뇨해 20~30ml를 배출하고 나서, 멈추지 말고 소변을 채뇨 용기에 채취한 후 멸균용기로 옮깁니다. 남성에서는 음경을 컵에 닿지 않게 해 전반뇨를 버려 중간 뇨를 채취합니다.
- 채뇨시 컵안에 손가락이 닿거나, 다른 이물질이 들어가지 않도록 주의합니다.
카테터 뇨 주의사항
- 노출부를 소독용 알코촐로 잘 닦아낸 후 주사기로 듀브관을 찔러 1~2ml를 흡인해 멸균용기에 주입합니다.
방광천자뇨 주의사항
- 노출부를 소독용 알코촐로 잘 닦아낸 후 주사기로 듀브관을 찔러 1~2ml를 흡인해 멸균용기에 주입합니다.
6) 생식기 검사대상 물체
여성생식기 주의사항
- 자궁경부관 : 자궁경 (윤활유를 묻히지 마십시오)을 사용해 자궁경부의 분비물 및 점액을 잘 닦아 취한 후, 면봉을 수밀리미터 정도 삽입하여 회전시켜 분비물을 채취한 후 즉시 수송배지에 넣습니다.
- 자궁 내막 : 상기와 같이 청결하게 닦은 후 주사기로 흡인하여 과잉의 공기를 제거한 후 바늘을 고무마개에 찌릅니다.
- 요도 : 채뇨 1시간 이후에 면봉을 요도에 약 2cm 삽입해 요도 분비물을 채취 후, 즉시 수송배지에 넣습니다.
- 질 : 자궁경 (윤활유를 묻히지 마십시오)을 사용해, 분비물을 주사기로 흡인, 고무마개에 찔러서 주입합니다.
남성 생식기 주의사항
- 요도 : 음경을 훑어 내려 분비물을 면봉에 채취 후 즉시 수송배지에 넣습니다.
- 전립선 : 직장으로부터 손가락으로 전립선을 맛사지 한 후 요도 검체와 같은 방법으로 분비물을 채취합니다.
7) 분변
주의사항
- 자면봉으로 배출된 변을 채취하여 수송배지에 넣습니다.
- 설사의 원인균 동정대상은 주로 장티푸스균, 이질균, 예르시니아, 캄필로박터, 장염비브리오 및 콜레라균 등 입니다.
- 세균성 설사 및 이질이 의심되는 환자에 대해서는, 유행지의 여행력 유무등을 기재합니다.
변배양 검사의 지침
- 동일 환자에서 특별한 이유나 설명 없이 2번 이상 변 배양을 하지 않습니다.
- 입원 3일 이후의 환자의 변 배양을 하지 않습니다.
- 설사 증세를 보이면서 항균제 사용력이 있는 연령 6개월 이상의 모든 환자에 대해서는 C, difficile toxin test를 합니다.
[참고사항]
※ 대장균 O157을 제외한 장염을 일으키는 대장균은 본원에서 실시하지 않고 있습니다.
8) 농 (고름) 및 천자액
주의사항
- 폐쇄성농양 및 체액의 채취는 피부 또는 점막 표면을 충분히 소독한 후 주사기로 내용물을 흡인하여 과잉의 공기를 제외한 후 바늘에 고무마개를 찔러 공기의 유입을 차단하거나 검체를 혐기성 배지에 넣어 검사실에 옮깁니다.
- 개방성 농양의 검체 채취는 창상 주변의 피부 또는 점액을 할 수 있는 한 잘 소독하여 심부의 농을 주사기로 흡인합니다.
주사기를 사용할 수 없을 때는, 손가락으로 상처 가장자리를 열어 멸균 면봉으로 주위의 피부나 점막에 접하지 않게 주의하 면서 심부를 닦아 검체로 이용합니다. 면봉은 즉시 수송배지에 들어가야 합니다.
[참고사항]
※ 농양 내용물 중의 험기성 균은 절개에 의해 공기에 접하면 사멸 또는 증식을 정지하므로 균의 검출이 어렵습니다.
9) 안과 검사대상 물체
주의사항
- 안과 검사대상 물체는 아래쪽 눈꺼풀의 안쪽 또는 안쪽 눈구석으로부터 감염균을 면봉으로 채취해, 즉시 미생물 수송 배지에 넣습니다.
10) 부비강 검사대상 물체
주의사항
- 코 세정 후 상악동에 구멍을 뚫어 주사기로 흡인해, 과잉의 공기를 제외하여 고무마개에 바늘을 천자하여 공기의 유입을 차단하거나 내용물을 미생물 혐기성배지에 넣습니다.
11) 피부 및 점막 물체
주의사항
- 피부 및 점막 표면의 고름이나 분비물은 주위의 부위에 접하지 않게 면봉으로 닦아 미생물균 수송배지(Y22)에 넣습니다.
12) 뇌척수액
주의사항
- 척수액은 3개의 시험관에 무균적으로 나누어 받으며, 첫째나 둘째 번에 받은 시험관을 세균검사에 쓰는 것이 보통입니다.
- 척수액을 멸균 시험관에 1~10㎖ 채취합니다.(결핵균이나 Cryptococcus 검사를 위해서는 10㎖ 정도가 적당합니다)
- 채취 즉시 검사실로 보내져야 하며, 검사가 지연될 때는 실온이나 37°C에 보관합니다 (단, 바이러스 배양일 경우는 냉장 보관을 합니다)
5. 뇌척수액 및 기타 체액(CSF & Body fluid)
뇌척수액
- 일반적으로 3개의 용기에 각각 2-4mL씩 차례대로 무균적으로 받아서, 각각 화학 / 혈청검사, 세균검사, 세포수 산정에 이용합니다.
기타체액
- 흉수, 복수, 심낭액 등을 이용하여 세포수 산정, 화학검사, 세균검사를 할 때는 Sodium citrate나 Heparin등의 항응고제를 사용하십시오.
- 단, clot 형성을 관찰할 때는 항응고제를 첨가하지 않습니다.
6. 대변
단회 대변
- 2-3 g 을 대변 용기에 채취하여 보내십시오.
- Occult blood에 대한 주의 사항은 본 안내서 검경, 미생물학 검사편을 참고하십시오.
7. 세포유전학 관련 검사
[검체 취급의 공통적 주의사항]
※ 검체는 무균적으로 채취되어야 합니다.
※ 의뢰 이유와 가족력은 의뢰지에 반드시 기록되어야 합니다.
※ 검체 채취부터 배양까지 24시간 이상이 지연될 경우에는 검사과정이 지연되거나 간혹 검사에 실패할 수도 있습니다.-검체 보관 및 운송은 실온 상태로 합니다.
※ 태아를 대상으로 하는 염색체 검사는 필요하다면 검체 채취 전에 이 검사의 정확성 및 검사 한계에 대해 환자나 보호자에게 충분히 설명을 하여 동의를 얻은 후에 검사를 시행하는 것이 바람직합니다.
말초혈액(Peripheral blood;P.B)
- 혈액 5mL (소아 3mL)를 무균적으로 채취해야 하며 Sodium heparin 용기에 넣어 응고되지 않도록 서서히 아래 위로 혼합합니다. 응고된 검체는 검사가 불가능합니다.
- Sodium heparin 이외의 항응고제는 세포 분열능 저하로 인하여 배양에 실패할 확률이 높습니다.
- 환자의 임상소견 및 추정 진단에 따라 검사 방법 자체가 달라지므로 반드시 의뢰서를 기록합니다.
- 검체 채취부터 배양까지 24시간 이상이 경과되면 검사에 실패할 확률이 높습니다.
- 검체 보관 및 운송은 실온 상태로 합니다.
- Fragile-X Syndrome 유무를 결정하고자 할 때는 검출률이 높은 Fragile-X DNA Study 방법이 바람직합니다.
태아조직(Products of conception;POC)
- 태아 조직의 경우 오염될 확률이 매우 높습니다. 무균적으로 채취한 조직을 DML이 제공하는 전용운송배지에 넣어 의뢰합니다.
- 자궁 내에서 사망한지 24시간 이상이 경과한 검체는 배양에 실패할 확률이 높습니다.
양수(Amniotic fluid:A.F)
- 검체에 모체 세포가 혼입되는 것을 방지하기 위해 채취 시 처음의 미소량 (약 2mL 정도)은 반드시 버린 다음에 약 20~30mL 정도의 양수를 채취합니다.
- 양수 20~30mL 채취하여 본원이 제공하는 50mL Conical Tube로 옮겨 의뢰합니다.
- 양수 내 태아 유래 세포가 적은 경우 (원심 후 침전물이 육안으로 확인이 안됨)나 육안적으로 검체의 색깔이 빨갛거나(혈액이 혼입되었음을 의미) 짙은 갈색인 경우는 배양에 실패할 수도 있습니다.
융모막(Chorionic villi sampling:C.V.S)
- 융모막 20~40 mg 을 채취하여 본원이 제공하는 융모막 전용 운송용 배지에 넣어 의뢰합니다.
- Zoom-stereo microscope으로 관찰하여 순수한 융모막이 적을 경우에는 직접법, In Situ와 플라스크 방법을 병행할수 없고, 단지 플라스크 방법만을 시행함으로써 모체 세포의 오염 가능성이 높아지고 결과가 지연되거나 혹은 배양에 실패할 수도 있습니다.
제대혈(Cord blood)
- 제대혈은 응고가 잘 되므로 채취 후 즉시 Sodium heparin 용기에 넣어 여러 번 잘 혼합합니다.
혈액종양질환의 진단, 예후 추정을 위한 염색체 검사
만성백혈병, 급성백혈병, 골수증식성 질환, 골수이형성증후군, 기타 혈액질환의 진단 및 예후 추정에 필요한 검사입니다.
골수(Bone Marrow)
- 골수 천자액 3mL 를 채취하여 본원에서 제공하는 Sodium heparin 용기에 넣어 의뢰합니다.
- 환자의 임상 소견 및 추정 진단에 따라 검사 방법 자체가 달라지므로 반드시 의뢰서를 기록합니다.
- 혈액 종양에서는 세포 배양 시 혈액 검사 결과를 고려해서 적절한 세포수가 되도록 배양해야 하므로 귀원에서 시행한 일반혈액검사 (CBC 결과)를 반드시 기록해 주십시오.
- 검체 채취부터 배양까지 24시간 이상이 지연될 경우에는 검사과정이 지연되거나 검사에 실패할 수도 있습니다.
- 응고된 검체는 검사가 불가능합니다.
말초혈액 (Peripheral Blood)-선천적 염색체 이상의 진단
- 다발성 선천성 기형의 진단이 필요한 경우(다운 증후군, 에드워드 증후군 등)
- 발육 부전 / 정신 지체 / 비정상 핵형이 의심되는 경우
- 2차적 성징이 지연되거나 나타나지 않는 경우
- 불임 부부 / 3회 이상의 반복 유산 / 사산의 기왕력을 가진 부부
- 염색체 이상 보인자의 확인이 필요한 경우
- 산전 태아의 염색체 이상 진단
- 산모의 나이가 35세 이상인 경우
- 모체 혈청을 이용한 Triple test에서 염색체 증후군이 의심되는 경우
- 태아의 초음파 검사에서 비정상 소견을 보인 경우
- 부모가 Reciprocal Balanced Translocation 인 경우 (염색체 이상의 보인자인 경우)
- 염색체 이상의 자녀를 출생한 기왕력이 있는 경우
- 융모막을 이용한 염색체 검사상 Mosaicism을 보인 경우에는 양수/제대혈을 이용하여 확인 검사를 시행하는 것이 바람직함.
[검체표시 약어설명]
※ S:혈청 , 24hrs U:24시간뇨, UK:뇨, AF:양수액, P:혈장, CSF:뇌척수액, RU:단회뇨, BM:골수액, W/B:전혈, BF:체액
8. 분자진단, 분자유전관련검사
- 분자진단 검사에서 가장 중요한 것은 적절한 검체와 오염의 방지입니다.
- 혈액을 이용하여 PCR검사를 의뢰하고자 할 경우의 원칙적으로 모든 검체는 EDTA Blood를 사용합니다.
- Hepatitis Virus 관련 검사는 항응고제가 없는 SST tube의 사용을 원칙으로 합니다.
- Papilloma Virus 관련 검사는 각 종목에 해당되는 전용용기를 반드시 사용해야 검사가 가능합니다.
- 조직으로 의뢰하는 검사의 경우 포르말린 고정을 금합니다.
- 안내서에 수록된 각 검사항목의 검체 종류를 확인하시고 적절한 용기를 사용하여 주십시오.
9. 산전 태아이상선별검사(Prenatal Screening Test)
임산부의 정보가 필요하므로 반드시 전용 의뢰지를 첨부하여야 합니다.(의뢰지에는 아래의 사항을 빠짐없이 기록)
- 실제 생년월일
- 체중
- 최종월경일 LMP
- 임신 주수 (초음파 (BPD), LMP), NT (Nuchal Translucency) 등
- 과거력 (Down, NTD 출산아 경험, 인슐린의존성당뇨(IDDM) 등)
- 재검 의뢰시 1차 결과, 기타 소견 등
[검사 시기 : 임신 10 ~ 13 주]
※ 1st Trimester : Double test (PAPP – A, Free beta – hCG)
[검사 시기 : 임신 14 ~ 22 주]
※ 2nd Trimester : Double test (AFP, hCG)
※ Triple test (AFP, uE3, hCG)
※ Quad test (AFP, uE3, hCG, Inhibin A)
1)신생아 선천성 대사이상검사(Newborn screen)을 위한 검체 채취시기
- 건강한 신생아의 경우 가장 이상적인 채혈 시기는 48-72시간 사이로, 일반적으로 퇴원 전 채혈하는 것이 좋습니다.
- 특정 아미노산의 혈중 증가율은 질환의 심각성이나 단백질 섭취량에 따라 달라지므로 너무 일찍 검사를 실시하는 경우 위음성을, 반대로 정상 신생아에서 출생 직후 TSH surge가 있으므로 48시간 이전에 채취한 검체에서는 갑상선 저하증에 대한 위양성의 결과를 초래할 수 있습니다.
- 입원 기간이 연장되는 미숙아 등에서는 생후 7일 정도에 검체를 채취하는 것이 좋으며, 입원일이 14일을 초과하는 경우는 퇴원 시, 1개월 이상일 경우는 1개월 째 재검을 실시함이 바람직합니다.
- 수혈이 필요한 경우는 가능하면 수혈 받기전에 추기 검체를 채취하도록 하며, 수혈 전 채취한 검체가 생후 24시간 이내에 채취 되었을 경우 생후 30일 및 60일에 재검을 실시하는 것이 좋습니다. 또한 채혈 card에 수혈 후 검체를 채취하였다는 내용과 함께 가장 최근 수혈한 날짜를 반드시 기입하여 주십시오.
2)검체 채취요령
다음은 신생아 선천성 대사이상 검사를 위한 검체 채취 방법으로, 신생아 발 뒷꿈치의 모세 혈관에서 fillter paper (혈액여지)를 이용하여 검체를 채취하는 요령입니다.
3) 체취 후 검체 조작 및 운송 시 주의점
10. 조직, 세포 병리검사를 위한 검체관리
조직, 세포 병리 검사는 인체의 적출된 조직 및 세포를 이용하여 병의 원인을 확인하기 위한 목적입니다.
조직 검체의 고정 및 운송 방법
- 수술조직을 새지 않는 용기에 옮긴 후 고정액으로 10% 중성 포르말린 (formalin)을 넣어 조직이 완전히 담기게 하십시오.
- 포르말린 고정액은 조직의 약 10배 정도의 양으로 넣으십시오.
- 포르말린을 사용하는 목적은 적출한 조직의 자가융해 및 건조를 방지하기 위한 것이며, 검체 보존성이 뛰어납니다.
- 만약 부위가 다른 곳에서 적출한 조직이라면 각각 다른 용기에 넣고 고정하십시오.
- Punch biopsy 등 작은 생검 조직은 거즈나 여과지에 붙여 유실되지 않도록 처치한 후 고정하십시오.
- 각 적출물에 따른 고정 방법은 다음과 같습니다.
- 자궁 (Uterus) 등 큰 장기 : 용기의 절단면을 아래로 하여 넣고, 고정액을 충분히 넣어 잠 기도록 하십시오.
- 소화관 (Stomach) 등 점막 장기 : 점막 부위를 밖으로 뒤집어 얇은 거즈로 잘 싸서 고정하 십시오.
- 폐 (Lung) : 기관지 말단으로부터 고정액을 주입하여, 가능한 폐포를 부풀려 공기를 빼고 조직 사이까지 골고루 고정액이 들어가도록 하십시오.
- 생검조직 (Punch biopsy) : 천자한 조직의 수분을 제거하고 거즈나 여과지에 10초 정도 올려 놓은 후, 그대로 포르말린에 고정하십시오. 조직이 작으므로 건조되지 않도록 주의하십시오.
세포 병리검사
- 세포 검사용 검체는 세포 변성을 방지하여 정확한 세포 관찰을 할 수 있도록 95% ethyl alcohol 또는 cytospray등 피복고정제 (coating fixation)로 반드시 고정하십시오.
- 95% 에탄올 (Ethyl alcohol)로 고정하는 경우 적어도 30분 이상 고정해야 합니다.
- 피복고정제 (coating fixation)는 도말된 슬라이드로부터 25-30 cm 거리를 둔 위치에서 분무합니다.
각 검체 종류에 따른 관리 방법은 다음과 같습니다.
부인과 재료 <자궁 질부, 경부, 내막 등>
- 검체는 한번에 많이 채취한 후 slide에 얇고 균일하게 도말하고, 세포 고정제를 분무하여 고정하십시오.
- Cytobrush를 사용하여 채취하십시오.
- 검체 채취 하루전에 질내 치료나 피임약제 등의 사용을 금해 주십시오.
- 검체 채취전 외상 치료나 biopsy 등을 행하지 마십시오. 혈액의 RBC가 슬라이드에 도말되어 판독이 어려워집니다.
- 액상세포용기를 사용하는 경우 Cytobrush로 채취한 모든 세포를 액상용기안의 액체에 풀어 넣은 다음 새지 않게 뚜껑을 잘 막아 보내십시오.
객담(Sputum)
- 아침 첫 객담을 받아 두 장의 slide 사이에 넣고, 전후 좌우로 비벼 펼친 다음, 즉시 95% ethyl alcohol에 고정하십시오.
- 채취 시 타액이 섞이지 않도록 주의하고, 객담 자체를 의뢰할 경우 12-24 시간 이내에 보내주십시오.
흉수액(Pleural fluid), 복수액(Ascitic fluid) 등 액체
- 가능한 전량을 혼합하여 원심한 후 egg albumin을 침사에 첨가하여 slide에 도말하고, 즉시 95% ethylalcohol로 고정하십시오.
- 도말이 불가능할 때 검체를 전부 냉장 보관하여 12-24시간 이내에 보내십시오.
Urine, CSF 등 protein 양이 적은 검체
- 원심분리기에서 1500 rpm으로 10분간 원심하여 침전물을 slide에 도말한 후 고정하여 보내십시오.
- 원심이 불가능 할 경우 검체에 50% ethyl alcohol을 검체의 양과 같은 양으로 혼합한 후 그대로 보내십시오.
천자액(Aspiration biopsy)- 유선, 갑상선, 림프액 등
- 2-4장의 Slide에 도말 후 일부는 즉시 고정하고, 일부는 slide 자연건조 후 고정하십시오.
- 검체량이 적은 경우 주사바늘과 주사통을 생리식염수로 세정하고 원심하여 침전물을 도말한 후 고정하십시오.
pH가 낮은 검체-위액, 담즙 등
- 검체는 얼음을 채운 후 box에 보관하고, 가능하면 수 분 이내에 원심하여 도말 slide를 만들어 고정하십시오.
- 고정이 불가능할 경우 70% ethyl alcohol을 검체의 1/3~1/4 정도의 양이 되도록 넣은 후, 얼음 box에 넣어 즉시 보내십시오.
검사결과에 오차를 초래하는 요인
응고(Clot)
- 항응고제와 혈액이 충분히 혼합되지 않을 경우 혈액학적 검사시 부분응고(Partial clot)로 인한 부정확한 결과를 초래합니다. 따라서, 항응고제가 든 용기에 채혈할 경우 충분히 잘 혼합하여(1~2분정도) 가능한 빠른 시간내에 의뢰해 주십시오.
용혈(Hemolysis)
- 용혈로 인하여 Hemoglobin과 다른 세포내 물질이 반응에 영향을 미치며 결과치의 상승 등을 초래합니다. 따라서, 채혈과 시험관 분주시에 주의하여야 합니다. 주사기로 채혈을 할 경우 피스톤은 너무 세게 잡아 당기지 마시고, 튜브에 담을때 튜브의 마개를 열어 주사바늘을 빼고 천천히 tube벽면에 흘려 넣습니다.
- 또한, 채혈 후 30분 정도 경과 후 원심분리하여 주십시오.
[용혈된 검체에 의한 결과에 영향을 주는 검사항목]
※ 증가 : Total protein, K, Iron, Inorganic P, Amylase, AST, ALT, LDH 등
※ 감소 : Bilirubin, Lipase, ACPS
[고지혈 혼탁(Lipemic)]
※ 식사 후에 채혈 할 경우 검체의 혼탁이 올 수 있습니다. 이러한 검체의 혼탁은 지질 검사의 결과에 영향을 주어 부정확 결과 (비특이적 수치 상승)를 초래합니다. 따라서, 검체항목에 따라 혈액채취를 12시간 공복유지 후에 합니다.
[식후 채혈시결과에 영향을 주는 검사항목]
※ 증가 : T뇨량, Glucose (혈액, 뇨), Triglyceride, Uric acid, Amylase, Insulin, Cholesterol. Lipoprotein, Catecholamine, Aldosterone VMA, Vitamin 등
※ 감소 : HB, Hct WBC, Total protein, Albumin, Iron
뇨
단회뇨(Random urine)
- 아침 첫뇨의 중간뇨를 받아 가능한 한 빠른시간 내에 의뢰해 주시고 수거 전까지 냉장보관하여 주십시오.
24시간 뇨(24 Hours urine)
- 아침 08 : 00시에 소변을 보게 하여 버린 후 다음날 아침 08:00시 소변까지 모두 24hrsU 채뇨봉투에 받습니다.(대변시의 소변도 포함)
- 검사항목 중 대부분은 냉장보관으로도 가능하나, 반드시 보존제를 넣어야 하는 경우에 지정된 보존제 정도를 용기에 담아서 보내주십시오.(축뇨량을 반드시 기입요망)
체액
- 체액(Body fluid) 중 채취 후 응고되기 쉬운 Pleural, Ascitic, Joint fluid 등은 응고(CSF 제외)되면 Cell count 나 Chemistry 검사종목에 큰 오차가 생깁니다.
11. 요보존제
- 요 보존제는 검사의 목적에 따라 적절하게 선택하시고, 그 약품명을 명시해 주십시오.
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